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产品简介:
一、扩增流程
1. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20ul无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2. 从-80°C冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3. 取2ul质粒加至100ul感受态中,冰浴30min;
4. 42°C热激90s,再冰浴2min;
5. 加入900ul无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6. 6000rpm离心5min,弃掉多余上清,仅留100ul上清,用枪头轻轻吹打混匀菌体沉淀;
7. 混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8. 将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9. 挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
注: 如果次日转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化