肌酸激酶(CK)活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC1140
规格:50T/48S
产品内容:
提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃避光保存,临用前加10mL蒸馏水溶解;用不完的分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂二:粉剂×1支,-20℃保存,临用前加入0.5mL蒸馏水溶解;用不完的分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂三:粉剂×1支,-20℃保存,临用前加入1mL蒸馏水溶解;用不完的分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂四:粉剂×2支,-20℃避光保存,临用前加入0.65mL蒸馏水溶解;用不完的分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂五:液体15mL×1瓶,4℃保存。
产品说明:
C肌酸激酶(Creatine Kinase,CK) (EC 2.7.3.2)也成为肌酸磷酸激酶,主要存在于*、肌肉以及脑等组织中,能可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应,是一个与细胞能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶。CK 催化磷酸肌酸和ADP 生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP 与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加,以此来表示CK酶活。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿、恒温水浴锅和蒸馏水。
操作步骤:
一、粗酶液提取
1. 组织样本:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10 的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。
2. 血清样本:直接测定。
3. 细胞样本:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液)加入提取液,冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后于4℃,10000g离心10min,取上清待测。
相关文献:
《Eriodictyol Attenuates Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury through the Activation of JAK2》 作者:Defang Li, Ning Lu, Jichun Han, Xiaoyu Chen, Wenjin Hao, Wenjuan Xu, Xiaona Liu, Lei Ye and Qiusheng Zheng 期刊:Frontiers in Immunology 影响因子:3.845 PMID:29441020
《Down-regulation of miR-320 exerts protective effects on myocardial I-R injury via facilitating Nrf2 expression.》 作者:Zhu XA, Gao LF, Zhang ZG, Xiang DK. 期刊:Eur Rev Med Pharmacol Sci 影响因子:2.721 PMID:30840298