产品名称：丙二醛(MDA)含量检测试剂盒
产品英文名：Malondialdehyde (MDA) Assay Kit
产品货号：BC0020                          产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼
产品规格：50管/48样                     产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：500
库存状态：现货                          
关键字：丙二醛试剂盒 

简要介绍：
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸，生成过氧化脂质；后者逐渐分解为一系列复杂的化合物，其中包括MDA。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。
MDA与硫代巴比tuo酸(thiobarbituric acid，TBA)缩合，生成红色产物，在532nm有*吸收峰，进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量；同时测定600nm下的吸光度，利用532nm与600nm下的吸光度的差值计算MDA的含量。
产品详细描述

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BC0020-50管/48样	500.00元

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：                                       
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸，生成过氧化脂质；后者逐渐分解为一系列复杂的化合 物，其中包括 MDA。通过检测 MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平。
测定原理： 
MDA 与硫代巴比tuo酸(thiobarbituric acid，TBA)缩合，生成红色产物，在 532nm有*吸收 峰，进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量；同时测定 600nm下的吸光度，利用532nm 与 600nm下的吸光度的差值计算 MDA 的含量。  
需自备的仪器和用品： 可见分光光度、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏 水。

试剂的组成和配置：
提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 30mL×1 瓶，4℃保存；
注意事项： 临用前注意试剂一是否完全溶解，如未溶解，可以70℃加热，并振荡以促进溶解。

MDA 提取：  
1、细菌、细胞或组织样品的制备： 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量 （104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL提 取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或200W，超声 3s，间隔 10s，重复30 次）； 8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织， 加入 1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。

测定步骤： 
1、吸取 0.6mL 试剂一于 1.5mL离心管中，再加入 0.2mL样本, 混匀。
2、95℃水浴中保温 30min（盖紧，防止水分散失），置于冰浴中冷却，10000g，25℃，离心 10min。
3、吸取上清液于 1mL玻璃比色皿中，测定 532nm和 600nm处的吸光度，记为 A532和 A600， ΔA= A532-A600。

MDA 含量计算： 

1. 血清（浆）中 MDA 含量的计算：

 MDA 含量(nmol/ mL)=[ ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷V 样=25.8×ΔA  
2、细菌、细胞或动物组织中 MDA 含量计算
（1）按照蛋白浓度计算 MDA 含量(nmol/ mg prot)=[ ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V 样)=25.8× ΔA ÷Cpr 需要另外测定，建议使用本公司 BCA蛋白质含量测定试剂盒。
（2）按照样品质量计算 MDA 含量(nmol/g 鲜重)=[ ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V 样÷V 样总)=25.8×ΔA ÷W
 (3 ) 按照细菌或细胞密度计算：
 MDA 含量(nmol/104)=[ ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(500×V 样÷V 样总)=0.0516×ΔA
V 反总：反应体系总体积， 8×10-4 L；ε：丙二醛摩尔消光系数，155×103 L / mol /cm；d： 比色皿光径，1cm；V 样：加入样本体积，0.2 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；Cpr： 样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万。

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