本期主题 什么是吸光值?
A260、A280和A230是紫外分光光度计在核酸浓度和纯度检测中常用的波长。通过这些波长的吸光值,可以计算出A260/A280和A260/A230比值,用于评估DNA或RNA的纯度。在质粒DNA提取中,比值异常通常反映样本被特定杂质污染。
下面先对质粒DNA浓度各数值代表的含义进行下详细的介绍。
一、各吸光值含义
二、理想的比值范围
对于更精确的定量,建议使用Qubit荧光定量或RiboGreen定量方法。
三、质粒DNA比值异常原因分析
因此,对于质粒DNA而言,吸光值超出正常范围时,实际浓度便会有不准确性,建议若有电泳结果,需要将NanoDrop测定的比值结合琼脂糖凝胶电泳的亮度一起判断质粒质量。
四、浓度虚高或偏低
● 质粒构型(如超螺旋、线性、开环)不同,在琼脂糖凝胶上的迁移速度不同,导致亮度与实际浓度不符。
● RNA残留(未完全降解的小RNA片段)污染,残留的RNA会在电泳上最下面看到有亮带残留,干扰对质粒浓度的判断。
● 蛋白质或酚类物质污染,紫外分光光度计测得的A260值偏高,导致质粒浓度虚高。
● 断裂的DNA片段,导致电泳亮度降低,但浓度测定仍显示较高值。
五、索莱宝质粒提取试剂盒:
提取纯化质粒DNA的得力助手,真实!
质粒是一种小型、环状的DNA分子,存在于细菌等微生物中。它们独立于细菌的染色体DNA存在,能够自主复制,并且可以携带各种基因。它们是科学家们手中的“基因载体”,能够帮助我们实现基因的转移、表达和调控。在分子生物学实验中,质粒提取是一项基础且关键的操作。一个优质的质粒提取试剂盒,能够帮助科研人员快速、高效地获取高质量的质粒DNA。
主要的应用领域
基因克隆:获取大量目标基因;基因库构建;基因序列分析
基因表达:蛋白质生产;功能研究
遗传工程:基因编辑;基因治疗;转基因生物
基因调控研究:启动子分析;转录因子研究;信号通路研究
生物制药:药物开发;疫苗制备;基因治疗药物
教育和科研工具:教学实验;科研工具
显著优势
操作简便,省时高效,安全环保
流程标准化:无需有毒试剂,避免传统方法中苯-酚、氯-仿等危险化学品的使用,只需离心即可完成。
快速提取:通常30-60分钟即可获得高纯度质粒DNA,适合高通量实验需求。
高纯度、高得率
采用柱式纯化技术,结合裂解和吸附配方,有效去除杂质(如RNA、蛋白质、基因组DNA)。
A260/A280=1.8-2.0,A260/A230=2.0-2.5,确保质粒提取的高浓度。
兼容性强,适用范围广
适用于多种大肠杆菌菌株,如DH5α等,对不同质粒均可轻松提取。
不同规模需求:从微量(1-5mL)到大量(100mL)培养物均可匹配。
下游应用广:可直接用于PCR、酶切、转化等高灵敏度实验。
灵活选择(不同级别试剂盒)
普通级:常规克隆、筛选
去内毒素级:细胞转染、基因治疗
索莱宝质粒提取试剂盒产品
货号 |
名称 |
D1100 |
质粒小量提取试剂盒 |
D1110 |
质粒大量提取试剂盒 |
D1120 |
革兰氏阳性菌质粒小量提取试剂盒 |
D1130 |
革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒 |
D1140 |
去内毒素质粒小量提取试剂盒 |
D1150 |
去内毒素质粒大量提取试剂盒 |
D1160 |
酵母质粒小量提取试剂盒 |
DM1100 |
质粒小量提取试剂盒(磁珠法) |