背景介绍

中性粒细胞是丰富的粒细胞类型，占人类所有白细胞的40%至70%。作为宿主抵抗入侵病原体的第一道防线，中性粒细胞具备固有的吞噬能力，可以吸收纳米颗粒和吞噬死亡的红细胞，并在激活后清除外来病原体和加载靶点；而且，还能跨血管迁移到临近组织的能力。中性粒细胞是在瑞氏（Wright）染色血涂片中，胞质呈无色或极浅的淡红色，有许多弥散分布的细小的（0.2～0.4微米）浅红或浅紫色的特有颗粒。细胞核呈杆状或2～5分叶状，叶与叶间有细丝相连。中性粒细胞具趋化作用、吞噬作用和杀菌作用。中性粒细胞来源于骨髓，具有分叶形或杆状的核，胞浆内含有大量既不嗜碱也不嗜酸的中性细颗粒。这些颗粒多是溶酶体，内含髓过氧化酶、溶菌酶、碱性磷酸酶和酸性水解酶等丰富的酶类，与细胞的吞噬和消化功能有关。

图1.中性粒细胞瑞氏

（Wright）染色图片

注：紫色为中性粒细胞；粉色为红细胞

产品介绍

作为天然免疫细胞的重要组成部分，中性粒细胞在多种疾病的发生发展中发挥着重要作用。为了进一步探讨其作用机制，常需分离人及动物外周血中性粒细胞进行研究。

市售产品-中性粒细胞分离试剂盒的产品缺点

目前，市面上大多数中性粒细胞分离试剂盒主要是根据全血中各细胞密度不同的特点，通过密度梯度离心法获取目的细胞。在实验过程中多存在以下问题并在一定程度上影响了实验结果：

1. 离心时红细胞沉降不全面，多聚集于中性粒细胞白膜层，导致白膜层不清晰；

2. 增加离心时间或离心力后，可以部分改善红细胞沉降结果，但仍能明显看到红细胞存在于白膜层或分离液中，且白膜层出现弥散；

3. 收集到的中性粒细胞层混有大量红细胞，可使用红细胞裂解液祛除红细胞干扰，但花费时间较长且有可能影响中性粒细胞表面抗原的表达；

4. 获取的细胞数量少且中性粒细胞纯度低。

市售产品-中性粒细胞分离试剂盒的分离结果展示

图2. 中性粒细胞分离试剂盒离心实际效果图

（人中性粒细胞分离实验为例）

注：中性粒细胞层有很多肉眼可见红细胞污染

图3. 中性粒细胞分离吉姆萨染色结果

（人中性粒细胞分离实验为例）

注：中性粒细胞层经染色后涂片观察，

图片中紫色为中性粒细胞；

图片中粉色为红细胞

为了进一步优化中性粒细胞分离效果，索莱宝研发了细胞分离专用的红细胞沉降液（货号R1000），采用新的“先沉降红细胞，后进行细胞分离”的实验方式，以较大程度降低红细胞的污染，并且提高了中性粒细胞的纯度及获得量。

                      新品-中性粒细胞分离试剂盒的试剂组成

新品-中性粒细胞分离试剂盒的产品优势

1. 同常规分离方案比，优化后的方案虽然增加了沉降红细胞的时间，但大大减少了离心时间且无需进行红细胞裂解，故二者总用时差异不大；

2. 使用优化方案离心后，离心管内中性粒细胞白环层较常规更加清晰且无红细胞聚集；

3. 优化后中性粒细胞的纯度较常规有明显提高。

                       新品-中性粒细胞分离试剂盒的分离结果展示

以人中性粒细胞分离试剂盒（P9402）为例说明

图4. 红细胞沉降液沉降及分离效果图

图5. 中性粒细胞分离试剂盒实际效果图

注：中性粒细胞层几乎没有肉眼可见红细胞污染

图6. 中性粒细胞分离试剂盒染色结果

注：中性粒细胞层有极少红细胞污染，

中性粒细胞纯度可以到90%至95%。

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